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- 品牌：wako
- 產(chǎn)地：國外
- 型號：20 μg×5
- 貨號：125-05061
- 純度：100
- 價格： ￥3000/支
- 發(fā)布日期： 2025-03-03
- 更新日期： 2025-03-03
| 產(chǎn)地 | 國外 |
| 品牌 | wako |
| 貨號 | 125-05061 |
| 用途 | 科研 |
| 包裝規(guī)格 | 20 μg×5 |
| CAS編號 | |
| 純度 | 100% |
| 是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品是質(zhì)譜分析前處理時常用的蛋白分解酶即賴氨酰肽鏈內(nèi)切酶，該酶可以特異性切除賴氨酸基團C末端的多肽，可用于蛋白測序分析和 Lys-X 化合物的酶合成。若同時使用賴氨酰肽鏈內(nèi)切酶和胰酶，可更好地切斷賴氨酸基團的多肽，增加多肽的數(shù)量。產(chǎn)品已按照使用習(xí)慣做成小包裝，是方便使用的冷凍干燥品。20 μg/支可用于100-200個樣品的凝膠內(nèi)消化。
來源：細(xì)菌
外觀：凍干粉（包含２ mmol/L Tris-HCl 緩沖液，pH８）
活性：0.03～0.07 AU/vial
分子量：27,000（瓊脂糖過濾），30,000（SDS-PAGE）
溶解性：溶于水或緩沖液
穩(wěn)定性：溶解于 pH 值 5.0-12.0 的 Tris 緩沖液中，可在４℃穩(wěn)定保存２年；在 pH 值 6.0-11.0、30℃時能穩(wěn)定保存，但溫度超過50℃時不穩(wěn)定。
最適pH值：9.0~9.5
等電點：6.9~7.0
底物特異性：
可水解底物——Tos-Lys-OMe、Bz-Lys-NH2、Bz-Lys-pNA、Lys-pNA
不可水解底物——Bz-Arg-NH2、Bz-Arg-pNA、Arg-pNA
抑制劑：DFP、PMSF、TLCK
◆特點
● 高特異性、高蛋白質(zhì)消化率、適用于蛋白質(zhì)譜分析
● 提高裂解效率、增加肽段數(shù)量
● 根據(jù)使用量特意制備小包裝，方便使用
◆應(yīng)用
分別采用胰蛋白酶（Tp）、賴氨酰肽鏈內(nèi)切酶（Lys-C）和 Tp與Lys-C 聯(lián)用進行膠內(nèi)酶切的效果比較。
牛血清蛋白 BSA 的條帶（100 ng）通過 SDS-PAGE 獲得，然后分別用 Tp、Lys-C 和 Lys-C+Tp 進行酶切，再用 MALDI-TOFMS 法進行分析。
這些蛋白酶的實驗效果見下表。
表 1：Tp、Lys-C 和 Lys-C+Tp 的結(jié)果對照
這些結(jié)果表明 Lys-C 酶解的漏切位點數(shù)（Missed Cleavage）最少。Tp 酶解時加入 Lys-C 后，漏切位點數(shù)有所降低，同時，可以鑒定出更多的多肽。
| | Tp | Lys-C | Lys-C+Tp |
| 裂解位點 | 精氨酸和賴氨酸的Ｃ端 | 賴氨酸的Ｃ端 | 精氨酸和賴氨酸的Ｃ端 |
| 漏切位點數(shù) （漏切位點所占比例） | 多（８%） | 很少（０%） | 少（３%） |
| 鑒定出的多肽數(shù)量 | １７ | １９ | ２２ |
胰蛋白酶（Tp）（圖 ａ）和賴氨酰肽鏈內(nèi)切酶（Lys-C）+Tp（ 圖 ｂ）酶切后的質(zhì)譜結(jié)果對照圖。
Lys-C+Tp 酶切后，可以在 m/z=2000 時得到吸收峰，而單獨的 Tp 酶切在 m/z=2000 時沒有吸收峰。該結(jié)果表明 Lys-C 可以提高測序覆蓋度。
( 數(shù)據(jù)由大阪醫(yī)療中心和婦嬰健康研究所Ｙ. Wada 博士提供 )
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