EZBioscience microRNA逆轉(zhuǎn)錄試劑盒(EZB-miRT4)

產(chǎn)品簡介：

EZBioscience microRNA逆轉(zhuǎn)錄試劑盒采用聚（A）拖尾反應(yīng)和逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的方法，在一步測定中合成miRNA的 鏈cDNA。來自總RNA的成熟miRNA通過使用大腸桿菌聚（A）聚合酶通過添加聚（A）延伸成熟轉(zhuǎn)錄物的3'端來修飾。然后，使用Oligo（dT）-通用標(biāo)簽引物對修飾的miRNA進(jìn)行通用逆轉(zhuǎn)錄，以合成所有miRNA的 鏈cDNA。

該試劑盒包含三管試劑：gDNA去除劑、miRNA RT酶混合物和4×miRNA RT緩沖液。

其中gDNA去除劑主要包括濃縮DNA酶和緩沖液。它只需在室溫（19～27°C）下反應(yīng)5分鐘，就可以降解95%以上的殘留基因組DNA，大大減少了對結(jié)果的干擾。

miRNA-RT酶混合物主要包含大腸桿菌聚（A）聚合酶、逆轉(zhuǎn)錄酶和核糖核酸酶抑制劑。大腸桿菌Poly（A）聚合酶不僅具有高效的Poly（A）拖尾反應(yīng)效率，而且特異性識別成熟的單鏈miRNA，從而避免了具有雙鏈結(jié)構(gòu)的miRNA前體的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。突變型M-MLV逆轉(zhuǎn)錄酶具有較強(qiáng)的抗干擾能力和擴(kuò)增能力。

4×miRNA-RT緩沖試劑包含用于Poly（A）拖尾反應(yīng)和逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的所有原料和引物，包括Oligo（dT）-通用標(biāo)簽引物、緩沖液和dNTP，并經(jīng)過精心優(yōu)化，以確保Poly（A）拖尾和逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)有效。

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